Разрешающая
способность микроскопов
Хотя со времен Левенгука увеличение оптических
микроскопов выросло с 300 до 1500 единиц, на пути дальнейшего роста разрешающей
способности стоит непреодолимый теорети-ческий барьер
– так называемый “предел Рэлея”.
Английский физик Джон Рэлей
в 70_х годах XIX века сформулировал принцип, в соответствии с которым предельное
разрешение микроскопа не может быть больше половины длины волны освещающего объект
света. Например, если освещать объект красным лазером с длиной волны
=650 нм, то предел разрешения окажется в 325 нм.
Это досадное препятствие объясняется явлением
дифракции света: изображение точки даже в идеальном, не вносящем никаких искажений
объективе, не воспринимается глазом как точка, так как вследствие дифракции является,
фактически, круглым светлым пятнышком конечного диаметра, окруженным несколькими
попеременно тёмными и светлыми кольцами. Если
же две светящиеся точки расположены на очень близком расстоянии друг от друга, то
их дифракционные картины накладываются одна на другую, давая в результате весьма
размытое изображение со сложным распределением освещенности.
В погоне за все более высоким оптическим разрешением
микроскописты шли на самые разные технические ухищрения.
В частности, была доведена до предела длина облучающего света, что привело к созданию
ультрафиолетовой микроскопии (280_300 нм), позволяющей визуализировать объекты размером
150_170 нм. Но, несмотря на то, что ультрафиолетовые микроскопы почти вдвое превосходят
обычные по разрешающей способности, они обладают одним серьезным недостатком: ультрафиолет
повреждает биообъекты, поэтому такие микроскопы совершенно не подходят для биотехнологических исследований.